En bioquímica, la diálisis es el proceso de separar las
moléculas en una solución por la diferencia en sus índices de difusión o
presión osmótica a través de una membrana semipermeable. La membrana
semipermeable cumple una función preponderante en el dializador esta es quien
permite el paso selectivo de las moléculas del disolvente, pero impide el paso
de compuestos de mayor peso y tamaño molecular)
La diálisis es una técnica común de laboratorio, y funciona
con el mismo principio que la diálisis médica. Típicamente una solución de
varios tipos de moléculas es puesta en un bolso semipermeable de diálisis,
conocido comúnmente como dializador. Nosotros fabricamos nuestro propio
dializador utilizando una botella cortada y papel celofán.
El dializador sellado se coloca en un envase con una solución diferente, o agua pura. Las moléculas lo suficientemente pequeñas como para pasar a través de los poros (a menudo agua, sales y otras moléculas pequeñas) tienden a moverse hacia adentro o hacia afuera del dializador en la dirección de la concentración más baja. Moléculas más grandes (a menudo proteínas, ADN, o polisacáridos) que tiene dimensiones significativamente mayores que el diámetro del poro son retenidas dentro del dializador. Una razón común de usar esta técnica puede ser para quitar la sal de una solución de la proteína. La técnica no distinguirá efectivamente entre proteínas.
En términos de medicina, este procedimiento suele utilizarse
para extraer las toxinas y el exceso de agua de la sangre, normalmente como
terapia renal sustitutiva tras la pérdida de la función renal en personas con
fallo renal.
En nuestro caso introducimos en nuestro dializador la
solución acuosa compuesta por ovoalbúmina y NaCl(Cloruro de Sodio). El NaCl,
como sal que es, en un medio acuoso se disocia en iones(Na+ Cl-)
En el recipiente (mayor) colocamos agua destilada. Tomamos
la precaución de que no sea agua de OSE ya que esta contiene el anión y ante la
presencia de AgNO3 nos daría positivo ya que este detecta la presencia de
cloruros.
Como queremos ver que es lo que pasa de la solución de
ovoalbúmina y NaCl al otro recipiente, si el agua del recipiente (2) tuviese de
antemano anión cloruro no podríamos saber si existió o no un cambio. Es por
esto que utilizamos agua destilada. El agua destilada es aquella sustancia cuya
composición se basa en la unidad de moléculas de H2O. Es aquella a la que se le
han eliminado los iones e impurezas mediante destilación
Materiales y reactivos:
• Recipiente (mayor)
(es el recipiente en el cual en nuestro dibujo se observa el agua
destilada)
• Dializador ( fabricado con una botella cortada y papel
celofán que constituye una membrana semipermeable)
• Ovoalbúmina
• AgNO3(nitrato de plata)
• NaCl(cloruro de sodio)
• Reactivo de Biuret (NaOH AL 10% y CuSO4)
• Agua destilada
Procedimiento
1) Colocar clara de huevo (ovoalbúmina) con NaCl en un vaso
de bohemia, homogenizar.
2) Colocar agua destilada en el recipiente (2)
3) Tomar muestras en tubos de ensayo de ambos sistemas y
hacer un ensayo de Biuret y de AgNO3 para cada uno, en busca de proteínas y
cloruro.
4) Registrar los resultados obtenidos
5) Colocar el dializador en el recipiente (2) que contiene
agua destilada
6) Colocar la mezcla de clara de huevo con NaCl en el
dializador
7) Esperar 10 o 15 minutos sin mover el dializador
8) Tomar en tubos de ensayo dos muestras de la solución
externa al dializador
9) Hacer en una de ellas un ensayo Biuret
10) En la otra colocar Nitrato de plata para comprobar si el
anión cloruro está presente en ella.
11) Registrar los resultados
Nota: Los pasos 3) y 4) pueden ser obviados ya que confiamos en
los elementos suministrados por el laboratorio.
Reacción
Reactivo de biuret
(ya se explicó previamente)
Nitrato de plata
Cuando los cationes de plata se encuentran con aniones de
cloruro, forman el cloruro de plata o AgCI, sal iónica. A diferencia del
nitrato de plata y del cloruro de sodio, el cloruro de plata no es soluble en
agua. Tan pronto como se forma, se "precipita" o sale de la solución.
El resultado de mezclar nitrato de plata con cloruro de sodio es la formación
inmediata de un sólido blanco que se deposita en el fondo del vaso o contenedor
de la reacción. Este es el AgCI. El nitrato de sodio, que es soluble en agua,
permanece debajo en el vaso precipitado.
Situación antes de la
diálisis:
Situación después de la dialisis
Conclusion
La muestra del interior dio positivo con AgNO3,
por otro lado la muestra exterior dio negativo con biuret. Esto implica que las
proteínas, al ser moléculas mucho más grandes, no pudieron atravesar la
membrana semi-permeable, por lo que quedaron contenidas dentro del dializador.
Mientras los cloruros, que son iones pequeños en relación a las moléculas de
ovoalbúmina, si pudieron atravesar la membrana semipermeable.
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